2×PCR Master Mix (With Dye);2×常规PCR预混液(含染料)

产品简介

本品是即用型的常规PCR预混合溶液,含有Taq DNA PolymerasedNTP混合物、MgCl2以及优化的缓冲体系。反应时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤。产品中含有溴酚蓝染料,PCR产物可以直接进行电泳。本产品中含有优良的稳定剂,在4℃条件下可以放置3个月。PCR产物具有3-dA突出端,可轻松克隆至T载体。

产品规格 

产品货号

N132002E

N132002S

N132002M

N132002L

产品规格

1 mL

5×1 mL

50×1 mL

100×1 mL

产品储存

-25~-15℃储存,有效期2年。干冰运输。

操作注意

1.本产品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。

2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3.本产品仅作科研用途!

操作说明

1.PCR反应体系和程序

组分

体积 (μL)

 

循环步骤

温度 (°C)

时间

循环数

模板DNA

适量

 

预变性

94

5 min

1

Primer 1 (10 μM)

2

 

变性

94

30 sec

35

Primer 2 (10 μM)

2

 

退火

50-60

30 sec

 

2×PCR Master Mix (With Dye)

25

 

延伸

72

30-60 sec/kb

 

ddH2O

to 50

 

终延伸

72

10 min

1

1 扩增体系(50 μL)

 

2 扩增条件

【注】:使用前请务必将其彻底混匀。

1)模板使用量:基因组DNA50-200 ng;质粒DNA0.1-10 ng

2Mg2+浓度:本产品中含有3 mMMgCl2,适合大部分PCR反应。

3)退火温度:请参考引物的理论Tm值,退火温度可设置低于引物理论值2-5℃。

4)延伸时间:分子鉴定建议30 sec/kb。基因克隆建议60 sec/kb,以保证产物量达到最高。

应用实例

1:2×PCR Master Mix (With Dye) 扩增1.2 kb片段。产品分别在-20℃放置1年,4°C放置3个月,25℃放置1个月后均可有效扩增目的片段。

模板:拟南芥基因组;退火温度:60℃延伸时间:40 sec。

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