细胞外基质凝胶是一种从EHS小鼠肿瘤中提取的可溶性基底膜制剂,富含细胞外基质蛋白。其主要成分包括层粘连蛋白、IV型胶原、肝素硫酸蛋白多糖(HSPG)、nidogen,以及TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织型纤溶酶原激活剂等生长因子,这些生长因子是EHS肿瘤固有的。在20世纪80年代中期,丹麦的J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm分别发现并特别描述了细胞外基质凝胶。主要的生产过程包括用生理盐水提取/洗涤肿瘤匀浆以获得可溶性蛋白,然后从产品中提取不溶性复合物的溶剂提取,以及在低温下用缓冲溶液进行透析以获得无色至淡黄色的溶液。
细胞外基质凝胶为组织和细胞提供了支持、拉伸强度和支架支持。它还作为细胞粘附和移动的三维结构,以及生长因子、趋化因子和细胞因子的储存库。此外,它还可以被用作细胞形态发生和分化的信号分子。
图:细胞外基质凝胶的应用指南
以下是使用由Arcegen Biologicals开发和生产的Arcegel细胞外基质凝胶及其他相关试剂进行实验所得到的结果。
侵袭实验和3D培养
血管生成
图:HUVEC细胞血管生成实验结果及血管免疫荧光染色
肿瘤内的
图:将HepG2细胞皮下植入到雌性BALB/c-nu小鼠体内,并观察了1个月。
类器官培养
相关产品 - 基质凝胶
Product Types |
Product Name |
Catalog Number |
Specification |
|
Basic Concentration
|
C231001 |
5/10 mL |
||
C231002 |
5/10 mL |
|||
Low Growth Factor |
C231003 |
5/10 mL |
||
C231004 |
5/10 mL |
|||
High Concentration
|
C231005 |
5/10 mL |
||
Arcegel Matrix High Concentration, Phenol Red-Free, LDEV-Free |
C231006 |
5/10 mL |
||
C231007 |
5/10 mL |
|||
Stem Cell-Specific |
C231008 |
5/10 mL |
||
Organoid-Specific |
Arcegel Matrix for Organoid culture, Phenol Red-Free, LDEV-Free |
C231009 |
5/10 mL |
相关产品 - 细胞因子
Wnt3a 类器官培养案例的结果
Protein Name |
Species |
Catalog Number |
Specifications |
Wnt3a |
Human |
100/500 ug |
|
R-Spondin 1
|
Human |
100/500 ug |
|
Mouse |
100/500 ug |
||
Noggin
|
Human |
100/500 ug |
|
Mouse |
C230612 |
100/500 ug |
|
EGF
|
Human |
C230329 |
100/500 ug |
Mouse |
C230540 |
100/500 ug |
|
FGF-2
|
Human |
C230295 |
100/500 ug |
Mouse |
C230522 |
100/500 ug |
|
FGF-4 |
Human |
C230346 |
100/500 ug |
FGF-7
|
Human |
C230417 |
100/500 ug |
Mouse |
C230587 |
100/500 ug |
|
FGF-9
|
Human |
C230347 |
100/500 ug |
Mouse |
C230548 |
100/500 ug |
|
FGF-10
|
Human |
C230418 |
100/500 ug |
Mouse |
C230588 |
100/500 ug |
|
FGF-19 |
Human |
C230343 |
100/500 ug |
Activin A |
Human/Mouse/Rat |
C230520 |
100/500 ug |
BMP-2 |
Human/Mouse/Rat |
C230308 |
100/500 ug |
BMP-4
|
Human |
C230310 |
100/500 ug |
Mouse |
C230249 |
100/500 ug |
|
BMP-7 |
Human |
C230311 |
100/500 ug |
DKK-1 |
Human |
C230321 |
100/500 ug |
HGF |
Human |
C230260 |
100/500 ug |
GDNF
|
Human |
C230355 |
100/500 ug |
Mouse |
C230552 |
100/500 ug |
|
IGF-1 |
Human |
C230371 |
100/500 ug |
Shh
|
Human |
C230493 |
100/500 ug |
Mouse |
C230624 |
100/500 ug |
|
BDNF |
Human |
C230262 |
100/500 ug |
NRG1 |
Human |
C230454 |
100/500 ug |
SHH
|
Human |
C230493 |
100/500 ug |
Mouse |
C230624 |
100/500 ug |
相关产品 - 类器官培养基
Product Type |
Product Name |
Catalog Number |
Specifications |
Mouse Small Intestine |
C231105 |
l00/500mL |
|
Colon Cancer (Human) |
C231106 |
l00/500mL |
|
Gastric Cancer (Human) |
C231107 |
l00/500mL |
|
Liver Cancer (Human) |
C231108 |
l00/500mL |
|
Breast Cancer (Human) |
C231109 |
l00/500mL |
|
Lung Cancer (Human) |
C231110 |
l00/500mL |
|
Esophageal Cancer (Human) |
C231111 |
l00/500mL |
|
Ovarian Cancer (Human) |
C231112 |
l00/500mL |
|
Pancreatic Cancer (Human) |
C231113 |
l00/500mL |
其他类器官培养试剂
Product Type |
Product Name |
Catalog Number |
Specifications |
Tissue Cell Digestion
|
Collagenase I |
C230120 |
100mg |
Collagenase II |
C230121 |
100mg |
|
Collagenase III |
C230122 |
100mg |
|
Collagenase IV |
C230123 |
100mg |
|
Collagenase V |
C230124 |
100mg |
|
Mycoplasma Series |
C230102 |
1mL |
|
C230105 |
25/60T |
附录
问:如何解冻Arcegel基质凝胶,需要多长时间才能解冻?
答:将整瓶Arcegel基质凝胶放入装有碎冰的盒子中,然后将盒子放入4°C的冰箱中过夜解冻,确保有足够的碎冰。解冻后,旋转瓶子检查Arcegel基质凝胶是否完全解冻,确保没有冰晶或凝胶块残留。我们建议过夜解冻,而蛋白质浓度较高的Arcegel基质凝胶可能需要更长时间。不要直接将Arcegel基质凝胶的瓶子放入4°C冰箱中解冻,也不要将装有Arcegel基质凝胶的冰盒放在冰箱门上或靠近冰箱门的地方。下图供参考:
问:Arcegel基质凝胶解冻后的状态是怎样的?
答:标准的Arcegel基质凝胶解冻后应为清澈的液体,不含酚红,这表明其清晰透明;蛋白质浓度越高,解冻后的液体粘度越大。请参考下图中的Arcegel基质凝胶解冻后的状态,左边两瓶是高浓度型,右边两瓶是标准型。
问:如何分装和冷冻Arcegel基质凝胶以备使用?
答:解冻后,Arcegel基质凝胶可以分装到多个小管中,这些管子都应该是预冷的冷冻管,快速冷冻并储存,以避免反复冻融。使用过程中涉及的所有物品在使用前都应预冷,包括预冷的移液枪、枪头和管子来处理基质凝胶。
问:在融化Arcegel基质凝胶时发现凝胶,为什么无法融化?
答:Arcegel基质凝胶对温度非常敏感。其在超过10°C的温度下开始凝胶化,而在超过22°C的温度下凝胶化过程会加速。如果即使在正常条件下接收后也发生凝胶化,这可能是因为融化程序不当或在融化过程中环境温度上升,导致部分凝胶化。因此,必须严格按照融化程序指南操作,并确保在融化过程中保持低温环境。
问:如何稀释Arcegel基质凝胶?
答:通常,Arcegel基质凝胶可以与预冷的无血清培养基或pH 7.4的PBS稀释。由于不同批次之间的浓度可能存在差异,建议根据具体的工作浓度进行稀释,而不是使用比例稀释或稀释因子。
问:使用Arcegel时应注意哪些事项?
答:所有与Arcegel基质凝胶接触的耗材和试剂都应预冷,整个操作过程应在冰上进行,以保持低温环境。Arcegel基质凝胶对温度非常敏感,一旦温度超过10°C就开始凝胶化。
细胞因子使用指南:
离心:收到后,瓶内含有冻干粉末。在打开前,快速离心10,000-12,000 rpm 30秒,以确保任何可能脱落的蛋白质附着在瓶盖或瓶壁上,沉积在瓶底。
复溶:根据说明,用指定的溶剂复溶,目标浓度范围为0.1-1.0 mg/mL。注意:避免剧烈涡旋,因为这可能导致蛋白质变性。用移液枪头轻轻敲打或让溶液在室温下放置一段时间可以帮助溶解。
稀释:用含有0.1% BSA、10% FBS或5%海藻糖的PBS或基础培养基溶液稀释(确保无菌)。使用上述任何一种稀释剂稀释复溶的蛋白质溶液,根据所需的工作浓度调整稀释浓度,但不低于10 μg/mL。分装到小管中,储存在-20至-80°C。
使用:需要时,解冻一份分装的细胞因子,并加入到培养基中以达到所需的浓度。避免细胞因子反复冻融。