原代细胞和神经干细胞转染是细胞实验一大难题，主要原因在于这两种细胞对于试剂毒性十分敏感，且分裂缓慢、体外状态脆弱，使得核酸转染十分困难。与其他细胞（如永生化细胞系）相比，它们对常规转染试剂的耐受性差，且转染后容易发生分化或凋亡，因此需要更精细优化的转染策略。
Arcegen推出的由新型多聚体高分子材料开发的升级版核酸转染试剂：Celthy SureXcel 3000（CAT#C130010），采用阳离子多聚体高分子材料替代传统脂质体，并具有独特的核酸保护机制，在保证核酸转染成功率的同时，将细胞毒性降到最低，能够满足各种转染需求，全核酸转染通用，已在多种细胞中得到验证。
Celthy SureXcel 3000（CAT#C130010）已被证实可以高效转染多种原代和神经干细胞。
案例1 原代猪肺泡巨噬细胞
核酸：质粒DNA（8000bp）；孔板：6孔板；核酸用量：2.5 μg；转染试剂用量：5 μL
（案例来源：中山大学）
案例2小鼠原代成纤维细胞
核酸：质粒DNA（6162bp）；孔板：12孔板；核酸用量：1 μg；转染试剂用量：2 μL
（案例来源：山东大学）
案例3 小鼠肝脏原代细胞
核酸：质粒DNA（9500bp）；孔板：3.5 cm皿；核酸用量：0.5 μg；转染试剂用量：1 μL
（案例来源：清华大学）
案例4 小鼠原代神经干细胞
核酸：mDNA；孔板：96孔板；核酸用量：20 ng；转染试剂用量：0.1 μL
（案例来源：汕头大学）
案例5 原代皮肤成纤维
核酸：质粒DNA（2112bp）；孔板：6孔板；核酸用量：2.5 μg；转染试剂用量：5 μL
（案例来源：复旦大学附属中山医院）
案例6 原代人肺动脉内皮细胞
核酸：质粒DNA（967bp）；孔板：24孔板；核酸用量：1 μg；转染试剂用量：2.5 μL
（案例来源：广东省人民医院）
以上细胞都是用Celthy SureXcel 3000（CAT#C130010）转染成功的。有你正在转染的细胞吗？可以参考我们的案例哦。
附：Celthy SureXcel 3000细胞转染试剂使用方法：
1. DNA转染
注：转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。
1） 细胞铺板，至转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳。
2） 按照下表使用Opti-MEM培养基稀释转染试剂溶液，轻轻混匀。
3） 使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Enhancer转染增强剂溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。
4） 将稀释的DNA加入已稀释的转染试剂溶液中(1:1比例)。
5） 室温孵育10-15分钟。
6） 将DNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。
2. siRNA转染
转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样，但在稀释siRNA时则不需要加入Enhancer转染增强剂。
3. mRNA转染
转染mRNA操作及用量与DNA的转染操作流程一样，但在稀释mRNA时则不需要加入Enhancer转染增强剂。
不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：
|
培养容器 |
培养基用量 |
DNA转染 |
siRNA转染（终浓度50 nM） |
||||
|
培养基体积 |
复合物中Opti-MEM体积 |
DNA（μg） |
转染试剂（μL） |
Enhancer转染增强剂（μL） |
siRNA体积（初始浓度20 μM） |
转染试剂（μL） |
|
|
96孔 |
100 μL |
2×5 μL |
0.1 |
0.2 |
0.2 |
0.25 μL |
0.3 |
|
48孔 |
250 μL |
2×12.5 μL |
0.25 |
0.5 |
0.5 |
0.625 μL |
0.75 |
|
24孔 |
500 μL |
2×25 μL |
0.5 |
1 |
1 |
1.25 μL |
1.5 |
|
12孔 |
1 mL |
2×50 μL |
1 |
2 |
2 |
2.5 μL |
3 |
|
6孔 |
2 mL |
2×125 μL |
2.5 |
5 |
5 |
5 μL |
7.5 |
|
60 mm |
5 mL |
2×250 μL |
5-10 |
10-20 |
10-20 |
12.5 μL |
20 |
|
10 cm |
10 mL |
2×500 μL |
15-25 |
30-50 |
30-50 |
25 μL |
40 |
|
T25 |
6 mL |
2×250 μL |
6-12 |
12-24 |
12-24 |
15 μL |
24 |
|
T75 |
15 mL |
2×750 μL |
20-40 |
40-80 |
40-80 |
37.5 μL |
60 |
【注】该表使用量仅供参考，核酸与转染试剂溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。
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| 中文名称 | 英文名称 | 产品货号 |
| Celthy SureXcel 3000转染试剂 | Celthy SureXcel 3000 Transfection Reagent | C130010 |
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