D-Luciferin, Potassium Salt

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产品简介

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

 

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOHKOH溶液。可溶于甲醇和DMSO;后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOHKOH溶液。可溶于甲醇和DMSO;后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 

产品说明

英文别名

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt

CAS 号

115144-35-9

公式

C11H7N2O3S2K

分子量

318.42 g/mol

外观

浅黄色粉末

溶解度

可溶于水(60 毫克 / 毫升)

 

产品规格

货号

C331501E

C331501S

C331501M

C331501L

规格

100 mg

500 mg

1 g

5 g

 

运输与储存

-20干燥避光储存,有效期1年。

 

操作注意

 

  1. 本品(firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)

-2-thiazoline-4-carboxylic acid,仅仅是不同公司在命名上的差异

  1. 注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间
  2. 如果要进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材,在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水
  3. 本品保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后,可以-20℃或-80℃分装冻存,避免反复冻融
  4. 在进行D-荧光素钾盐的溶解时,应使用无钙镁离子的DPBS,因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,从而影响检测
  5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

本产品仅作科研用途

 

操作说明

 

  1. 体外生物发光检测
  1. 用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30 mg/mL的储存液 (100-200×) ,混匀后立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。
  2. 用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15-0.3 mg/mL的工作液浓度
  3. 去除细胞培养基。
  4. 待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10 min,然后进行图像分析
  1. 活体成像分析
  1. 用无菌的DPBS (w/o Mg2+Ca2+) 配制15 mg/mL的荧光素的储存液,混匀。
  2. 0.2 µm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。
  3. 腹腔注射(i.p.),按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。
  4. 注射入体内10-15 min(待光信号达到最强稳定平台期)后进行成像分析。

【注】:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期

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