Celthy mRNA Transfection Reagent

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产品简介

Celthy mRNA 转染试剂是一款针对 mRNA 细胞转染的阳离子多聚物转染试剂,对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。可将其直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样就可以减少无血清环境对细胞的损伤。转染后一般不需要除去核酸-转染试剂复合物或更换新鲜培养基,当然也可根据细胞营养状态在 4-6 小时后更换新鲜培养基。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品 2-8ºC 保存,一年有效。不可冷冻!

 

注意事项

1、转染操作时,以细胞融合度达 70%-80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2、制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释 mRNA 和转染试剂。

3、使用无 RNA 酶污染的耗材与试剂。

4、2-8ºC 保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

5、初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、本产品仅用于科研。

 

使用说明

24 孔板为例,其他培养板加样体积请参考下表)

【注】转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1、细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达 70%-80%为佳。

2、按照以下体系配制 mRNA-转染试剂复合物:

1)对于每孔细胞,使用 10 μL 无血清培养基(如 OPTI-MEM 培养基)稀释 0.4 μg mRNA,轻轻混匀。

2)对于每孔细胞,使用 10 μL 无血清培养基(如OPTI-MEM 培养基)稀释 0.8-1.6 μL转染试剂,轻轻混匀,室温孵育 5 min。

3)将稀释的 mRNA 与稀释的转染试剂轻轻混匀。

4)室温静置孵育 20 min。

3、将 mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

4、37℃,5% CO2 培养箱培养 24-96 h,直至进行基因表达分析。

表1 不同细胞培养容器转染用量(仅供参考)

培养容器

表面积

每孔体积

mRNA 转染

培养基体积

稀释液体积

mRNA

试剂体积

96-well

0.3 cm2

100 μL

2×5 μL

0.2 μg

0.2-0.4 μL

24-well

2 cm2

500 μL

2×10 μL

0.4 μg

0.8-1.6 μL

12-well

4 cm2

1 mL

2×20 μL

0.8 μg

1.6-3.2 μL

6-well

10 cm2

2 mL

2×50 μL

1 μg

2-4 μL

60-mm

20 cm2

5 mL

2×100 μL

4 μg

8-16 μL

10-cm

60 cm2

15 mL

2×300 μL

12 μg

24-48 μL

【注】该表使用量仅供参考,mRNA 与转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在 1:0.5-1:5 之间。

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