产品简介

Celthy Univer 纳米脂质体转染试剂是基于最新的纳米技术研发的一款多用途、便捷高效的脂质体转染试剂，适用于 DNA、RNA 和寡核苷酸的转染，对难转染细胞也具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸-转染试剂复合物或更换新鲜培养基，也可根据细胞营养状态在 4-6 小时后更换新鲜培养基。

 

产品组分

组分编号	组分名称	C130008S	C130008M	C130008L
C130008-A	Univer-A 溶液	0.5 mL	1 mL	5×1 mL
C130008-B	Univer-B 溶液	0.5 mL	1 mL	5×1 mL

 

储存条件 

冰袋（wet ice）运输。产品2-8ºC保存，一年有效。不可冷冻！

 

注意事项

1. 转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳，具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2. 制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释 DNA 和转染试剂。

3. 转染的时候培养基中不能添加抗生素。

4. 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率，质粒中的内毒素是转染的大敌。

5. 2-8ºC保存，要注意避免多次反复长时间开盖。

6. 初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

7. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并戴一次性手套，在通风橱中进行操作。

8. 本产品仅用于科研。

 

使用说明

1、DNA 转染

【注】转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1）细胞铺板，至转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳。

2）按照下表使用Opti-MEM 培养基稀释Univer-B溶液，轻轻混匀。

3）使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Univer-A溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。

4）将稀释的DNA加入已稀释的Univer-B溶液中(1:1比例)。

5）室温孵育5分钟。

6）将 DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。

7）37℃，5% CO₂培养箱培养48-96 h，直至进行基因表达分析。

 

2.siRNA 转染

转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样，但在稀释 siRNA 时则不需要加入Univer-A溶液(第3步)。不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养皿		96-well	24-well	6-well
贴壁细胞		1-4×104	0.5-2×105	0.25-1×106
使用 Opti-MEM 培养基稀释Univer-B 溶液，轻轻混匀	Opti-MEM 培养基	5 μL	25 μL	125 μL
	Univer-B 溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
使用Opti-MEM 培养基稀释DNA， 得到 DNA 预混液，然后添加Univer-A 溶液，轻轻混匀，得到稀释的 DNA	Opti-MEM 培养基	5 μL	25 μL	125 μL
	DNA (0.5–5 μg/μL)	0.1 μg	0.5 μg	2.5 μg
	Univer-A 溶液(2 μL/μg DNA)	0.2 μL	1 μL	5 μL
将稀释的 DNA 加入已稀释的Univer-B 溶液中(1:1 比例)	稀释的 DNA	5 μL	25 μL	125 μL
	稀释的 Univer-B 溶液	5 μL	25 μL	125 μL
室温孵育 5 分钟
DNA-脂质体复合物形成	复合物成分（每孔）	96-well	24-well	6-well
	Opti-MEM 培养基	10 μL	50 μL	250 μL
	DNA(0.5–5 μg/μL)	0.1 μg	0.5 μg	2.5 μg
	Univer-B 溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
	Univer-A 溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀	DNA-脂质体复合物	10 μL	50 μL	250 μL

【注】该表使用量仅供参考，DNA与Univer-B溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。